病毒库-HIV病毒如何与静止的CD4+T细胞作用

静止的CD4+ T细胞几乎不适应遗传操作，因为现有的方法通常假设细胞分裂，Keppler解释说。“静止的细胞根据定义是不会分裂的。”作为开发新方法的第一步，科学家团队优化了栽培条件。因此，研究人员在从健康捐赠者的血液中提取这些细胞后，能够在实验室中保持它们的存活，不仅是像以前那样的3-4天，而是长达6周。这一决定性的进展伴随着核作用的进步。核作用是一种特殊的方法，可以将试剂送入细胞的细胞核。利用这项技术，研究人员将基因剪刀CRISPR-Cas引入到静止的CD4+ T细胞中，使它们能够对宿主细胞的基因组进行有针对性的修改——例如，通过所谓的敲除方法来消除基因。“这种组合非常有效，我们能够触及并操纵大约98%的细胞。而且，我们没有激活CD4+ T细胞。”Keppler说。“特别令人兴奋的是，我们能够通过一次核作用同时高效地消除多达6个基因。在此之前，没有人能在原代细胞中做到这一点——我们用从完整器官中分离出来的细胞做到了这一点。”

在未来，研究人员将能够消除单个基因和整个信号通路，并分析它们的功能。通过敲除相应的基因，他们已经设法弄清楚了4个以前备受争议的细胞因子是否在HIV感染中起作用。

在此基础上，他们寻求第二种“敲入”方法，即插入额外的或稍作修改的基因，例如绿色荧光蛋白(GFP)基因。在这种蛋白质的帮助下，研究人员可以分析目标基因在特定条件下的活性变化，或者标记特定的蛋白质。“所有这些都让我们第一次有机会研究在生理条件下HIV与人类静止的CD4+ T细胞之间的相互作用，”该研究的共同第一作者Adrian Ruhle解释道。“但我们也可以更好地研究这些细胞作为免疫细胞的一般作用，而不仅仅是艾滋病毒。”从长远来看，这组科学家希望对这些细胞的生物学有更好的了解，从而找到从患者体内彻底消除艾滋病毒的新方法，因为全世界仍有约3700万人感染了这种病毒。

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